EGF—PE40抗原性检定

EGF-PE40是由人表皮生长因子（EGF）基因与绿脓杆菌外毒素A（PEA）的跨膜亚单位和毒力亚单位（PE40）基因融合，在大肠杆菌内表达的重组毒素。它可以特异性识别EGF受体过度表达的癌细胞，具有特异杀伤癌细胞的作用。该融合蛋白的Mr为4.55×104，如作为药物长期静注可能致使病人体内抗体水平增高，从而影响其药效。本试验以家兔为模型，连续28d（1个疗程）静注EGF-PE40纯品，应用ELISA和琼扩分别测定了其血清中结合抗体水平和中和抗体水平的动态变化。结果显示，血清结合抗体水平随静注时间的延长而增高，28d时最高可达1∶212；在静注EGF-PE40的同时，静注2倍于人体剂量的免疫抑制剂环磷酰胺，其血清结合抗体水平与不用环磷酰胺组相比虽略有降低，但经F检验，二者无显著性差异；应用试验28d结合抗体水平最高的兔血清与不同质量浓度（80、40、20、10、5、2.5mg/L）的EGF-PE40进行琼扩，均无沉淀线产生；被检血清、健兔血清和阳性对照血清分别与质量浓度为105、35、28mg/L的EGF作用24h后，再与阳性对照血清进行琼扩反应,结果除阳性对照血清与105mg/LEGF-PE40的反应物无沉淀生成外，其余各孔均有沉淀线生成，表明连续28d用药未在兔体内产生可检测到的中和抗体，与用弗氏佐剂免疫制备的阳性对照兔血清相比较，其中和抗体不足以削弱EGF-PE40的作用。

Determination of Antigenicity of EGF-PE40