| 布鲁氏菌侵染对类泛素SUMO-1表达的影响及类泛素SUMO-1慢病毒表达载体的构建 |
| |
| 引用本文： | 李启峰,丁金花,窦文静,张辉,陈创夫. 布鲁氏菌侵染对类泛素SUMO-1表达的影响及类泛素SUMO-1慢病毒表达载体的构建[J]. 中国畜牧兽医, 2016, 43(6): 1422-1429. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.06.004 |
| |
| 作者姓名： | 李启峰 丁金花 窦文静 张辉 陈创夫 |
| |
| 作者单位： | 1. 石河子大学动物科技学院, 石河子 832003;2. 石河子市兽医卫生检疫所, 石河子 832000 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(31260596、31572491) |
| |
| 摘 要： | 研究布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后类泛素SUMO-1的表达变化,并构建小鼠类泛素SUMO-1基因过表达的慢病毒载体。本试验分别利用布鲁氏菌16M、M5-90侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测细胞中类泛素SUMO-1的表达;利用DNA重组技术将类泛素SUMO-1基因片段插入到慢病毒表达载体pLEX-MCS 中,获得重组慢病毒质粒pLEX-SUMO-1,测序鉴定成功后转染293T 细胞,包装好的慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,并利用实时荧光定量PCR、Western blotting方法分别检测细胞中类泛素SUMO-1 mRNA及蛋白表达水平。结果表明,布鲁氏菌16M、M5-90侵染细胞后,在感染早期类泛素SUMO-1的表达受到抑制,12 h内呈现下降趋势,在12 h后开始上升,极显著高于正常水平(P < 0.01);测序结果证明,类泛素SUMO-1基因正确插入到pLEX-MCS 质粒中;实时荧光定量PCR方法检测表明,类泛素SUMO-1 mRNA转录水平上调。由此可见,布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7能够引起细胞内类泛素SUMO-1表达的改变;成功构建了类泛素SUMO-1慢病毒过表达载体,为进一步研究类泛素SUMO-1的功能奠定基础。
|
| 关 键 词： | 布鲁氏菌 类泛素SUMO-1 慢病毒载体 小鼠巨噬细胞 |
| 收稿时间： | 2015-11-18 |
Effect on Expression of SUMO-1 in Cells Infected by Brucella and Construction of Lentivirus Vector that Over-expressing SUMO-1 |
| |
| LI Qi-feng,DING Jin-hua,DOU Wen-jing,ZHANG Hui,CHEN Chuang-fu. Effect on Expression of SUMO-1 in Cells Infected by Brucella and Construction of Lentivirus Vector that Over-expressing SUMO-1[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2016, 43(6): 1422-1429. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.06.004 |
| |
| Authors: | LI Qi-feng DING Jin-hua DOU Wen-jing ZHANG Hui CHEN Chuang-fu |
| |
| Affiliation: | 1. College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi 832003, China;2. Shihezi Veterinary Health Quarantine Institute, Shihezi 832000, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Brucella small ubiquitin-related modifier SUMO-1 lentivirus vector murine macrophages |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国畜牧兽医》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国畜牧兽医》下载全文 |
|
