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Nsp9基因在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响
引用本文:赵孟孟,冯松林,王文佳,邢星,冯嘉萍,张桂红. Nsp9基因在Marc-145细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2016, 43(12): 3114-3120. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.005
作者姓名:赵孟孟  冯松林  王文佳  邢星  冯嘉萍  张桂红
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002;
2. 华南农业大学兽医学院, 国家生猪种业工程技术研究中心, 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室, 广州 510642;
3. 河南牧业经济学院制药工程学院, 郑州 450046;
4. 广西钦州保税港区出入境检验检疫局, 钦州 535008
基金项目:国家自然科学基金:猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp9功能研究(31272564);公益性行业(农业)科研专项经费(201203039);国家生猪现代农业产业技术体系项目(CARS-36);国家重点研发计划课题(2016YFD0500707)
摘    要:试验旨在验证Nsp9基因是否影响猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的复制。构建含有Nsp9全长基因的质粒pIRES2-EGFP-Nsp9,并转染到Marc-145细胞中,接毒之后分别通过实时荧光定量PCR和Western blotting方法测定PRRSV N蛋白在mRNA和蛋白水平的表达。结果显示,转染Nsp9基因的Marc-145细胞上PRRSV的N蛋白在mRNA水平上显著高于未转染Nsp9基因的对照组(P<0.05),是对照组的1.5倍,同时转染Nsp9基因后的Marc-145上PRRSV N蛋白水平也明显高于对照组。随着剂量的增加,N蛋白的表达量在mRNA和蛋白水平都有所增加。由以上结果初步可知,Nsp9基因可以在Marc-145细胞上促进PRRSV的复制,Nsp9基因与其复制密切相关。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  Nsp9基因  Marc-145细胞  复制  
收稿时间:2016-02-16

Effect of Nsp9 Gene on Replication of PRRSV in Marc-145 Cells
ZHAO Meng-meng,FENG Song-lin,WANG Wen-jia,XING Xing,FENG Jia-ping,ZHANG Gui-hong. Effect of Nsp9 Gene on Replication of PRRSV in Marc-145 Cells[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2016, 43(12): 3114-3120. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.005
Authors:ZHAO Meng-meng  FENG Song-lin  WANG Wen-jia  XING Xing  FENG Jia-ping  ZHANG Gui-hong
Abstract:In order to evaluate whether Nsp9 could enhance the replication of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), pIRES2-EGFP-Nsp9 plasmid containing whole Nsp9 genome were transfected into Marc-145 cells,Real-time PCR and Western blotting were used to evaluate the expression of N protein after PRRSV was inoculated. The results showed that the level of N protein in the Nsp9 transfected cells was significantly higher than control group (P<0.05),which was 1.5 times higher. Meanwhile,the expression at protein level had the same trend as the mRNA level. When the dose of plasmid was increasing,the expression of N protein both at the mRNA and protein levels were increased. In conclusion,Nsp9 gene could enhance the replication of PRRSV in Marc-145 cells.
Keywords:PRRSV  Nsp9 gene  Marc-145 cell  replication  
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