| 信号转导及转录活化因子基因(stat3)转染牛乳腺上皮细胞及生物学特性观察 |
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| 引用本文： | 刘甲,何玉龙,吕品,孙健红,张涌.信号转导及转录活化因子基因(stat3)转染牛乳腺上皮细胞及生物学特性观察[J].农业生物技术学报,2009,17(3). |
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| 作者姓名： | 刘甲 何玉龙 吕品 孙健红 张涌 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 应用PCR技术从含有人信号转导及转录活化因子(star3)基因cDNA的质粒pOTa7中扩增star3基因片段.将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中.构建重组表达质粒.利用脂质体介导法将重组表达质粒转染原代牛乳腺上皮细胞(bovinemammary epithelial cells).G418筛选阳性克隆.RT-PCR检测star3基因在牛乳腺上皮细胞中的表达,并通过流式细胞术(flowcytometry)检测转染细胞的增殖能力、周期以及DNA含量.结果表明.转染24 h后大约16%的细胞被导入含star3基因的重组表达质粒.在mRNA水平证实细胞内有stat3基因的高表达.导人star3基因后,细胞增殖能力增强,染色体变为三倍体,细胞的增殖寿命较对照细胞延长了13代.表明导入star3基因能延长体外培养的牛乳腺上皮细胞的寿命.
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| 关 键 词： | 信号转导及转录活化因子(star3)基因 牛乳腺上皮细胞 转染 生物学特性 |
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