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生长抑素(SS)与硫氧还原蛋白(Thioredoxin)相融合生成的2种基因工程化融合蛋白SS-N/X和SS-N/S的表达特性
引用本文:刘永庆,陈溥言,杜念兴,赵国屏. 生长抑素(SS)与硫氧还原蛋白(Thioredoxin)相融合生成的2种基因工程化融合蛋白SS-N/X和SS-N/S的表达特性[J]. 中国兽医学报, 2003, 23(2): 172-176
作者姓名:刘永庆  陈溥言  杜念兴  赵国屏
作者单位:1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
2. 中国科学院上海生物工程研究中心,上海,200233
摘    要:对基因工程化生长抑素(somatostatin,SS)-硫氧还原蛋白(Thioredoxin)融合蛋白SS-N/X和SS-N/S的表达产量、水溶性、Triton X-100对SS融合蛋白水溶性的影响、包涵体的溶解和复性特点以及SS的抗原性与免疫原性等特性进行了研究。结果显示,在30℃的低温下用IPTG诱导表达,SS-N/X融合蛋白主要以可溶性形式存在,占75.8%,色涵体仅占24.2%;而SS-N/S融合蛋白则主要以包涵体的形式存在,占81.1%,可溶性蛋白仅占18.9%;32C载体(pEG-32C)蛋白则居二者之间,可溶性蛋白与包涵体大约等比例出现。SS-N/S在低温下诱导可超量表达SS融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的40.94%。0.5% Triton X-100对融合蛋白的不溶性有非常显著的影响,几乎可使所有的SS-N/X融合蛋白和大部分SS-N/S融合蛋白及32C硫氧还原蛋白变成水溶性的。32C硫氧还原蛋白包涵体在尿素中的溶解度明显高于SS-N/S包涵体,2mol/L尿素可使近一半的32C硫氧还原蛋白包涵体溶解,而SS-N/S包涵体只有27.5%溶解;但在5mol/L尿素时,两者均可基本全部变为可溶性的。在SS融合蛋白包涵体溶解时加入还原剂二硫苏糖醇,可明显降低SS的抗原性。SS融合蛋白(水溶性融合蛋白和复性后的包涵体)具有良好的SS抗原性和免疫原性。由SS融合蛋白与弗氏不完全佐剂制成试验用疫苗,免疫BALB/c小鼠、仔猪和羔羊等动物,可显著提高免疫动物的增重。

关 键 词:硫氧还原蛋白 基因工程化融合蛋白 生长抑素 SS 基因工程疫苗 抗原性 免疫原性
文章编号:1005-4545(2003)02-0172-05
修稿时间:2002-03-20

Expressional Characteristics of the Two Engineered Fusion Proteins of Somato- statin (SS)-Thioredoxin :SS-N/X and SS-N/S
LIU Yong-qing ,CHEN Pu-yan ,DU Nian-xing ,ZHAO Guo-ping. Expressional Characteristics of the Two Engineered Fusion Proteins of Somato- statin (SS)-Thioredoxin :SS-N/X and SS-N/S[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2003, 23(2): 172-176
Authors:LIU Yong-qing   CHEN Pu-yan   DU Nian-xing   ZHAO Guo-ping
Affiliation:LIU Yong-qing 1,CHEN Pu-yan 1*,DU Nian-xing 1,ZHAO Guo-ping 2
Abstract:
Keywords:somatostatin(SS)  fusion protein  inclusion body  expression  over expression  SS fusion protein vaccines  growth promotion
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