基于量子点荧光探针的过氧化氢酶活性及酶量的快速测定

目的]提出一种基于量子点荧光探针的过氧化氢酶活性及酶量检测方法。方法]以谷胱甘肽(GSH)稳定的CdTe/CdS量子点为荧光探针,对过氧化氢酶活性及酶量进行定量分析。结果]酶活性检测基于荧光猝灭法,对荧光猝灭机理进行探讨,并对试验参数进行优化,得到反应溶液最优pH为9,量子点与过氧化氢最优反应时间为10 min。在最优条件下,对过氧化氢酶活性进行检测,检测范围为0.25～12.00U/L,过氧化氢和酶反应前后荧光差值(F_1-F_n)与猝灭前荧光值(F_0)的比与过氧化氢酶活性有较好的相关性(R~2=0.953)。酶量检测基于竞争免疫荧光法,通过对固化时间、抗体浓度等参数的优化,获得酶量检测的最优模型,检测范围为0.04～1.40 mg/L(R~2=0.964)。通过简单的样品前处理,对大米中的过氧化氢酶活性及酶量进行检测,得到酶活性检测加标回收率为92.0%～114.0%,酶量检测加标回收率为85.0%～115.0%。结论]该方法操作简单、准确、灵敏,通过一次简单的样品前处理,获得酶活性及酶量检测的食品样品提取液,为食品中过氧化氢酶活性及酶量的快速测定提供了一种新的思路。

Rapid Determination of Catalase Activity and Enzyme Amount Based on Quantum Dot Fluorescent Probe