| 抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张 鸯,陶明亮,路保通. 抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2013, 41(3): 27-32 |
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| 作者姓名： | 张 鸯 陶明亮 路保通 |
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| 作者单位： | 宝鸡市陈仓区慕仪镇政府;太白县畜牧兽医技术推广站;宝鸡市兽医局 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(39970544)；西北农林科技大学青年骨干教师支持计划项目(01140305) |
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| 摘 要： | 【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水抗体;采用间接ELISA、单克隆抗体亚型检测试剂盒、免疫印记技术、曲线拟合方案等分别鉴定单抗效价、亚型、特异性和亲和力等特性。【结果】免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5 000以上,细胞融合克隆率为98.96%,阳性克隆率为30.18%,筛选出2株抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤细胞,其培养上清效价均达到1∶800,腹水单抗效价分别为1∶105和1∶2×105,亲和常数分别为2.5×106和2.3×106。制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的亚型均为IgG1类型。【结论】制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体具有较高的效价和较强的亲和力,可用于进一步研究Zhangfei蛋白在机体中的生理作用。
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| 关 键 词： | Zhangfei蛋白 抗体效价 细胞融合 单克隆抗体 特异性 |
| 收稿时间： | 2012-06-26 |
Preparation and identification of monoclonal antibodies against Zhangfei fusion protein |
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| ZHANG Yang,TAO Ming-liang,LU Bao-tong,JIN Ya-ping. Preparation and identification of monoclonal antibodies against Zhangfei fusion protein[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2013, 41(3): 27-32 |
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| Authors: | ZHANG Yang TAO Ming-liang LU Bao-tong JIN Ya-ping |
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| Affiliation: | 1 Government of MuyiTown of Animal Husbandry,Chencang,Baoji,Shaanxi 721300,China;2 Technology of Animal Husbandry and Veterinarian Spreaded Station,Taibai,Baoji,Shaanxi 721202,China;3 Bureau of Veterinary, Baoji,Shaanxi 721001,China;4 Key Laboratory of Animal Reproductive Endocrinology and Embryo Biotechnology, Ministry of Agriculture,College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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