| 玉米SSⅡb蛋白多克隆抗体的制备及其应用 |
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| 引用本文： | 余国武,青芸,何珊,黄玉碧.玉米SSⅡb蛋白多克隆抗体的制备及其应用[J].作物学报,2022(1):259-264. |
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| 作者姓名： | 余国武 青芸 何珊 黄玉碧 |
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| 作者单位： | 四川农业大学农学院作物科学国家级实验教学示范中心 |
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| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08003-001);国家自然科学基金项目(31501322);四川省博士后科研特别资助项目(03130104);留学回国人员科技活动择优资助项目(00124300)资助。 |
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| 摘 要： | 抗体是蛋白质功能研究的重要试剂。玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展。玉米淀粉合酶Ⅱb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸。但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶Ⅱb的C端(455～704 aa) GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSⅡb多克隆抗体。Western blot试验发现, SSⅡb多克隆抗体不但能识别SSⅡb-C (455～704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSⅡb蛋白。利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSⅡb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSⅡb的转录水平最高。这些结果表明成功制备了特异的玉米SSⅡb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSⅡb蛋白,为进一步深入研究SSⅡb蛋白功能奠定基础。
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| 关 键 词： | SSⅡb 多克隆抗体 原核表达 Western blot |
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