鹅源鼠伤寒沙门菌crp、hfq基因缺失株的构建及生物学特性分析 |
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引用本文: | 李仕楷,刘佳琪,李荣旭,苏文楠,陈亦杏,郑炜鸿,朱婉君,陈济铛,张济培.鹅源鼠伤寒沙门菌crp、hfq基因缺失株的构建及生物学特性分析[J].中国预防兽医学报,2023(1):17-24. |
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作者姓名: | 李仕楷 刘佳琪 李荣旭 苏文楠 陈亦杏 郑炜鸿 朱婉君 陈济铛 张济培 |
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作者单位: | 1. 佛山科学技术学院生命科学与工程学院;2. 佛山科学技术学院禽病研究所;4. 佛山万牧洲生物科技有限公司 |
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基金项目: | 广东省普通高校科研项目重点领域专项基金资助项目:广东地区鹅群重要疫病监控和新型乡村养鹅技术服务体系构建(2020ZDZX1018); |
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摘 要: | 为构建鹅鼠伤寒沙门菌单基因缺失株并鉴定其生物学特性,本研究以广东地区鹅源鼠伤寒沙门菌流行株A29为研究对象,采用λ-Red同源重组技术,分别构建crp、hfq基因缺失株(A29Δcrp和A29Δhfq)及相应基因回补株,并分别采用相应引物经PCR鉴定。通过细菌培养,对各菌株生物学特性进行比较;通过PCR鉴定各菌株的遗传稳定性;采用K-B纸片扩散法检测各菌株的药物敏感性;将各菌株纯培养物经腹腔注射4周龄小鼠,测定各菌株对小鼠的毒力,并观察感染后小鼠的临床症状及各组织剖检病变与组织病理变化。PCR和测序结果表明,正确构建各基因缺失株和相应回补株。生物学特性试验结果显示,与亲本株相比,A29Δcrp菌落直径极显著变小(P<0.001),不产酸、不产生H2S,菌体极显著变短(P<0.001);A29Δhfq菌落边缘不整齐,不产生H2S,菌体极显著变长(P<0.001),表明crp、hfq基因影响细菌的菌落形态、生化特性和形态特征。菌株遗传稳定试验结果显示,菌株传至60代时,基因缺失株仍能够稳定缺失。药敏试验结果显示,与亲本株比较,A...
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关 键 词: | 鹅源鼠伤寒沙门菌 基因敲除 crp基因 hfq基因 生物学特性 |
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