| 布鲁氏菌重组L7/L12蛋白对小鼠免疫保护效果的评价 |
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| 引用本文： | 谢珊珊,王月丽,邓肖玉,席静,于水发,马忠臣,王震,孟闯,苗玉和,徐艺玫,易继海,陈创夫.布鲁氏菌重组L7/L12蛋白对小鼠免疫保护效果的评价[J].中国预防兽医学报,2023(1):72-78+87. |
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| 作者姓名： | 谢珊珊 王月丽 邓肖玉 席静 于水发 马忠臣 王震 孟闯 苗玉和 徐艺玫 易继海 陈创夫 |
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| 作者单位： | 1. 石河子大学动物科技学院;2. 人兽共患传染性疾病防治协同创新中心;3. 江苏省人兽共患病学重点实验室;4. 福建圣维生物科技有限公司;5. 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(U1803236、32002245)； |
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| 摘 要： | 为探究布鲁氏菌候选保护性抗原L7/L12的免疫原性及其对小鼠的免疫保护效果，本研究经PCR扩增羊种布鲁氏菌16M株L7/L12基因，构建重组质粒p ET-22b-L7/L12，经双酶切鉴定正确后转化E.coli BL21(DE3)中，通过IPTG诱导表达并纯化后利用SDS-PAGE与western blot检测。结果显示，获得了16 ku的重组L7/L12蛋白(r L7/L12)，且纯化效果较好。将r L7/L12以100μg/只腹腔注射免疫6周龄SPF BALB/c小鼠，14 d后以50μg/只加强免疫。首免后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d及49 d分别对所有小鼠尾静脉采血，通过间接ELISA方法检测小鼠血清中的Ig G抗体、其亚型(IgG1、Ig G2a)抗体水平及二者比值；并利用ELISA方法检测首免后21 d和35 d两组小鼠血清中细胞因子IL-2、IL-10和TNF-α的分泌水平。结果显示，首免后14 d，小鼠血清中Ig G抗体水平迅速升高，于首免后21 d达峰值并持续至首免后49 d (P<0.01)，对照组小鼠则一直无抗体产生；首免后14 ...
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| 关 键 词： | 布鲁氏菌 保护效果 ELISpot |
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