atpA基因缺失对貉源大肠杆菌生物学特性的影响 |
| |
作者姓名: | 侯冠欣 马亚娟 王苗 孙欣艺 王利丽 张闫 张春晓 张志强 |
| |
作者单位: | 1. 河北科技师范学院;2. 河北农业大学;3. 武汉市动物疫病预防控制中心 |
| |
基金项目: | 河北省省级科技计划资助(19226629D);;河北省高等学校科学技术研究项目(BJ2021055); |
| |
摘 要: | 为研究编码ATP合酶α亚基对大肠杆菌生物学特性的影响,本研究利用λ-Red同源重组技术构建貉源致病性大肠杆菌LCE-1 (WT) atpA基因缺失菌株LCE-1ΔatpA (KO)和基因回补株LCE-1ΔatpA/pBR322-atpA (RS),并均采用PCR和测序鉴定。在此基础上,进一步分析atpA基因缺失对大肠杆菌的生长特性、生化特性的影响,结果显示,在LB培养基中KO菌株与WT菌株相比生长无明显差异,但在M9培养基中生长明显减缓;KO菌株的部分生化特性也发生了变化,对蔗糖、肌醇的分解利用发生改变,α-葡萄糖苷酶、β葡萄糖醛酸酶、精氨酸双水解酶活性也发生了改变。通过试管及微量结晶紫法分析3株菌生物被膜(BF)的形成能力,结果显示atp基因缺失能够显著降低大肠杆菌BF的形成能力(P<0.01)。对这3株菌进行酸应激、碱应激、热应激以及氧化应激测定这3种菌株对环境变化的应激能力,结果显示atp基因缺失能够显著提高大肠杆菌对酸应激、碱应激、热应激和氧化应激的敏感性。通过K-B纸片法对这3株菌的耐药性进行测定,结果显示KO菌株对多种抗生素的敏感性有所增强。利用KO、WT菌株分别感染...
|
关 键 词: | 貉源致病性大肠杆菌 λ-Red同源重组 atpA基因缺失 |
|