| 结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 蔡珠明,党光辉,臧鑫鑫,邵明珠,唐阳阳,鹿萍,崔莹莹,崔子寅,刘思国.结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用[J].中国预防兽医学报,2023(1):51-59. |
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| 作者姓名： | 蔡珠明 党光辉 臧鑫鑫 邵明珠 唐阳阳 鹿萍 崔莹莹 崔子寅 刘思国 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队;2. 吉林农业大学动物科技学院 |
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| 基金项目： | 新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划“兵团牛羊集约化养殖场幼畜高发疫病病原库建立”项目（2019AB029）；;国家自然科学基金（32002256、31772767）； |
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| 摘 要： | 结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等；非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌，包含4个亚种，分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(MAH)、禽分枝杆菌副结核亚种/副结核分枝杆菌(MAP)和禽分枝杆菌森林土壤亚种(MAS)。为建立MTBC、MAP和MAA的多重荧光定量PCR检测方法，本研究基于MTBC、MAP和MAA的特异性基因devR、F57和IS901分别设计引物及探针，通过优化各反应条件，建立了一种可同时检测3种分枝杆菌的多重Taq Man荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示，该方法对MTB、MB、MAP、MAA和MAS检测为阳性，对其他畜禽病原菌，包括MAH、13种NTM和7种非分枝杆菌检测结果均为阴性，特异性较强。敏感性试验结果显示，该方法对MB、MAP和MAA重组质粒标准品的检测限均为1.0拷贝/μL，敏感性较高；重复性试验结果显示，批内与批间重复性试验变异系数均小于2.5%，重复性较好。利用该方法检测体外模拟污染(MB、MAP和MAA菌液浓度分别为1.0...
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌复合群 副结核分枝杆菌 禽分枝杆菌禽亚种 多重Taq Man荧光定量PCR |
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