Q热贝氏柯克斯体环介导等温扩增实时浊度检测法的建立 |
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引用本文: | 贾广乐,徐丽丽,廖娟红.Q热贝氏柯克斯体环介导等温扩增实时浊度检测法的建立[J].中国畜牧兽医,2013,0(5):19-22. |
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作者姓名: | 贾广乐 徐丽丽 廖娟红 |
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作者单位: | 中国检验检疫科学研究院, 北京 100121 |
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基金项目: | 动物Q热检疫技术及标准研究(201110247)。 |
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摘 要: | 根据Q热贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)插入序列IS1111序列设计1套特异性引物,建立快速检测Q热的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)实时浊度检测方法。以梯度稀释含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,在恒温反应条件下,对靶基因的特定区域进行扩增,建立LAMP检测方法。结果显示,该方法能够检测出10个拷贝数的阳性质粒,而对结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、衣原体(C.psittaci)、布鲁氏杆菌(Brucella.spp)及部分牛血液的核酸样本的特异性检测结果均为阴性,无交叉反应。本研究建立的LAMP实时浊度检测方法灵敏度高、特异性好,在Q热的检测与鉴定中具有良好的应用前景。
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关 键 词: | Q热 贝氏柯克斯体 环介导等温扩增 实时浊度检测法 |
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