新城疫北京强毒株融合糖蛋白(F)基因的克隆及序列分析 |
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作者姓名: | 霍龙飞 |
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作者单位: | 中国农业大学生物学院生物化学与生物分子学系!北京100094 |
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摘 要: | NDV北京强毒株F48E9经SPF鸡胚增殖 ,超速离心纯化 ,异硫氰酸胍法提取病毒RNA后 ,用RT -PCR扩增 ,得到其融合糖蛋白(F)基因。将扩增产物与pGEM -T载体相连接转化 ,经过Amp -IPTG -Xgal(AIX)平板筛选、HindⅢ酶切及PCR鉴定 ,初步获得了含F基因的阳性克隆。用渐近法对克隆片段进行全序列分析 ,证明得到了全长1744个核苷酸的NDVF蛋白基因。所获得F基因与国外已报道的6个强毒株序列进行比较 ,可知F48E9与其它毒株均有一定差异(氨基酸差异在26/553—44/553) ,但…
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