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猪白细胞介素-12的分子克隆与序列测定
引用本文:兰文升,童光志,仇华吉,周艳君,王云峰,郭海龙. 猪白细胞介素-12的分子克隆与序列测定[J]. 动物医学进展, 2002, 23(1): 38-41
作者姓名:兰文升  童光志  仇华吉  周艳君  王云峰  郭海龙
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
摘    要:为研究白细胞介素-12在机体免疫应答中的作用。从猪外周血提取单个核细胞(PBMCs),用含LPS的培养基培养细胞,从培养2h和12h的活化细胞中分别提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出编码猪IL-12两个亚基的基因,其大小分别为720bp(P35)和1044bp(P40),将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化,用SacI和SalI双酶切后,分别将其连接至pUC18质粒上,进行质粒PCR和SacI,SalI双酶切鉴定后筛选阳性克隆,并进行序列测定和分析,序列分析表明P35基因开放阅读框含有669个核苷酸,序列与人,小鼠和羊同源性分别为79.2%,37.6%,86.1%,P40基因开放阅读框含有975个核苷酸,与人和小鼠,羊基因序列的同源性分别为79.5%,53.1%,84.3%。结果表明克隆到了猪白细胞介素-12P35和P40两个亚基的基因,得到的P35基因序列与国外报道完全一致,P40基因序列与发表的序列有4个碱基差异,提示P40基因可能存在多态性。

关 键 词:猪白细胞介素-12 基因克隆 序列测定 免疫调节作用
文章编号:1007-5038(2002)01-0038-04
修稿时间:2001-06-19

Cloning and Sequencing of Porcine IL-12
LAN Wen-sheng,TONG Guang-zhi,QIU Hua-ji,ZHOU Yan-jun,WANG Yun- feng,GUO Hai-long. Cloning and Sequencing of Porcine IL-12[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2002, 23(1): 38-41
Authors:LAN Wen-sheng  TONG Guang-zhi  QIU Hua-ji  ZHOU Yan-jun  WANG Yun- feng  GUO Hai-long
Abstract:
Keywords:
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