| CpG寡脱氧核苷酸长链DNA的克隆及重组质粒载体的构建 |
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| 引用本文： | 司兴奎,张济培,陈建红. CpG寡脱氧核苷酸长链DNA的克隆及重组质粒载体的构建[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2009, 0(11) |
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| 作者姓名： | 司兴奎 张济培 陈建红 |
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| 作者单位： | 佛山科学技术学院,动物医学系,广东,佛山,528231 |
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| 基金项目： | 佛山科学技术学院重点课题基金 |
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| 摘 要： | 为构建长链CpG ODN DNA,将合成的含有CpG的GTCGTT核心序列以TT间隔开后重复3次,并在3′端添加polyG结构,而后在其两翼人为添加Xba Ⅰ的黏性末端(简称为A链)后合成与其互补的互补链(简称为B链),通过退火形成CpG ODN DNA单体,以DNA连接酶将CpG单体连接为多聚体后再以A链和B链作为引物,利用SOE-PCR技术对poly CpG ODN DNA进行长链扩增,分别将600～700 bp片段克隆到pMD-18T载体中,并获得相应的重组子pUC44、pUC26及pUC30.序列分析结果表明:3个重组子与理论上产生的含有10,11,13个CTAGATCGT(CG)TTTTGT(CG)TTTTGT(CG)TTGAGGGGGGAT拷贝长链CpG ODN DNA标准序列的同源性分别为97.4%、97.9%和97.1%.
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| 关 键 词： | 长链CpG ODN DNA 重组质粒 |
Cloning and construction of recombinant plasmids containing long strand CpG oligodeoxynucleotides DNA |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SOE-PCR |
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