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实时荧光定量RT-PCR检测中、强毒力新城疫病毒RNA
引用本文:岳华,俞宁,汤承,李名杨. 实时荧光定量RT-PCR检测中、强毒力新城疫病毒RNA[J]. 中国兽医学报, 2007, 27(3): 300-304
作者姓名:岳华  俞宁  汤承  李名杨
作者单位:1. 西南大学,园艺园林学院,重庆,北碚,400715;西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041
2. 西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041
3. 西南大学,园艺园林学院,重庆,北碚,400715
摘    要:根据新城疫病毒(NDV)核苷酸序列,设计针对中、强毒力NDVF基因编码融合蛋白裂解位点的核苷酸序列引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量反转录荧光定量PCR(RRT—PCR)检测中、强毒力NDVRNA的方法。该方法能从舍有NDVI系疫苗毒、NDV标准强毒株F48E9(基因Ⅸ型)、分离鸡源强毒株(基因Ⅶ型)和鸽源强毒株(基因VI型)样本中检出NDVRNA,不与NDV弱毒株(LaSota、Clone30、B1、V4)、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒及健康鸡组织RNA发生交叉反应,对NDV核酸的最小检出量为60个拷贝,具有检测速度快、特异性强、灵敏度高、重复性和稳定性好等特点。从9个临床样本中均检测出阳性信号(9/9),PCR产物经测序证明均舍有NDV强毒株F基因裂解位点;用其中8份病料接种SPF鸡胚分离病毒,分离率为5/8。

关 键 词:鸡新城疫病毒  毒力  荧光定量RT-PCR  诊断
文章编号:1005-4545(2007)03-0300-05
修稿时间:2005-09-12

Development of real-time reverse-transcription PCR for detection of mesogenic and virulent Newcastle disease virus RNA
YUE Hua,YU Ning,TANG Cheng,LI Ming-yang. Development of real-time reverse-transcription PCR for detection of mesogenic and virulent Newcastle disease virus RNA[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2007, 27(3): 300-304
Authors:YUE Hua  YU Ning  TANG Cheng  LI Ming-yang
Affiliation:1. Horticulture and Landscape College, Southwest University, Beibei, Chongqing 400715 ,China; Life Science and Technology College, Southwest University for Nationalities,Chengdu 610041 ,China
Abstract:
Keywords:Newcastle disease virus   virulence   real-time RT-PCR   diagnosis
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