| 猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 周艳君,薛强,安同庆,仇华吉,童光志,王云峰,田志军,王玫,蔡雪辉. 猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白单克隆抗体的制备[J]. 中国预防兽医学报, 2005, 27(6): 498-503 |
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| 作者姓名： | 周艳君 薛强 安同庆 仇华吉 童光志 王云峰 田志军 王玫 蔡雪辉 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目，科技部科研项目 |
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| 摘 要： | 本研究是利用我国PRRS病毒分离株CH-1a株浓缩的病毒抗原免疫BALB/c小鼠,经3次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以PRRS病毒作为抗原进行间接ELISA检测,共筛选到22个阳性细胞株.分别经过3轮单克隆后,最终得到了16株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株.利用IDEXX-ELISA检测试剂盒和IFA试验对16株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的16株细胞分泌的抗体都是针对PRRSV的特异性抗体.将此16株单克隆抗体分别与用原核系统表达的PRRSV N蛋白、rtM和rtGP5蛋白进行特异性ELISA检测试验,结果表明16株单克隆抗体都仅识别表达的N蛋白,而与其它两种蛋白不发生反应,说明所获得的16株单克隆抗体均为抗PRRSV核衣壳蛋白的.单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示,除01MAb为IgG2b、N1H11为IgG2a外,其余的单克隆抗体均为IgG1,而且所有单克隆抗体的轻链均为к链.至此证实我们获得了16株PRRV N蛋白单克隆抗体,这将为今后建立更为灵敏的检测PRRS病原的特异性诊断方法、分析PRRSV核衣壳蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位奠定重要基础.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 核衣壳蛋白 |
| 文章编号： | 1008-0589(2005)06-0498-06 |
| 收稿时间： | 2004-08-15 |
| 修稿时间： | 2004-08-15 |
Development of monoclonal antibodies against nucleocapsid protein of PRRSV CH-1a strain |
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| ZHOU Yan-jun,XUE Qiang,AN Tong-qing,QIU Huan-ji,TONG Guang-zhi,WANG Yun-feng,TIAN Zhi-jun,WANG Mei,CAI Xue-hui. Development of monoclonal antibodies against nucleocapsid protein of PRRSV CH-1a strain[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2005, 27(6): 498-503 |
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| Authors: | ZHOU Yan-jun XUE Qiang AN Tong-qing QIU Huan-ji TONG Guang-zhi WANG Yun-feng TIAN Zhi-jun WANG Mei CAI Xue-hui |
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| Affiliation: | National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, CAAS, Harbin 150001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus monoclonal antibody nucleocapsid protein |
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