| 樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析 |
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| 引用本文： | 浦月霞,刘龙山,龚美霞,冉艳萍,贾雪峰,黄景滩,宋宪军,安春梅,唐顺明.樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析[J].蚕业科学,2018,44(3):382-389. |
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| 作者姓名： | 浦月霞 刘龙山 龚美霞 冉艳萍 贾雪峰 黄景滩 宋宪军 安春梅 唐顺明 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区蚕业技术推广总站,南宁530007;江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江212018;江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江212018;广西壮族自治区蚕业技术推广总站,南宁,530007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;广西自然科学基金;江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c DNA,命名为Pcc HE(Gen Bank登录号:MH119084)。Pcc HE基因c DNA全长为964 bp,由5'-UTR、3'-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;Pcc HE蛋白序列含有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于Pcc HE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测Pcc HE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;Pcc HE在5龄3 d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达。上述结果表明,Pcc HE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。
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| 关 键 词： | 樗蚕 孵化酶 基因克隆 表达特性 |
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