杆状病毒表达系统融合表达猪圆环病毒2型Cap蛋白与口蹄疫病毒VP1蛋白及免疫原性评估 |
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作者姓名: | 刘小康 江乾森 杨意 陈健 何玉龙 杨芳 唐少君 舒建洪 |
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作者单位: | 浙江理工大学生命科学学院,杭州,310018;杭州洪桥中科基因技术有限公司,杭州,310018;浙江理工大学生命科学学院,杭州310018;杭州洪桥中科基因技术有限公司,杭州310018 |
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基金项目: | 浙江省公益技术应用研究项目;杭州经济技术开发区产学研合作项目 |
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摘 要: | 猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白,能诱导宿主产生特异性免疫应答。口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能刺激机体产生中和抗体。利用杆状病毒表面展示系统,将这2种病毒蛋白与猪CD40配体(CD40 ligand,CD40L)进行融合表达并展示在杆状病毒表面,构建了rv Ac-Cap、rv Ac-VP1和rv Ac-Cap-VP1 3种重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blotting检测3种重组杆状病毒感染的Sf9细胞总蛋白,证明3种融合蛋白成功表达。纯化的重组杆状病毒颗粒以1×108pfu/只的剂量免疫接种BALB/c小鼠,通过间接ELISA检测血清中Cap和VP1的抗体浓度,证明表面展示有Cap和VP1的重组杆状病毒能激发小鼠产生较高水平的抗体,与PCV2和FMDV商品化疫苗免疫组的抗体浓度差异不显著(P0.05),表明该重组杆状病毒具有较好的免疫原性。
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关 键 词: | 猪圆环病毒2型Cap蛋白 口蹄疫病毒VP1蛋白 杆状病毒 表面展示 免疫原性 |
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