| 携带抗口蹄疫病毒ScFv基因猪成纤维细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 孙丹丹,李霄,王婧,尹熙俊,康锦丹,鲁月,李太元,金宁一.携带抗口蹄疫病毒ScFv基因猪成纤维细胞系的建立[J].兽医大学学报,2012(2):172-176. |
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| 作者姓名： | 孙丹丹 李霄 王婧 尹熙俊 康锦丹 鲁月 李太元 金宁一 |
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| 作者单位： | [1]延边大学农学院,吉林延吉133002 [2]军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育重大专项（2009ZX08006-002B）; 自然科学基金资助项目（81101140）; 吉林省重大科技攻关资助项目（10ZDGG007） |
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| 摘 要： | 根据口蹄疫病毒的感染特征及其在临床发病过程中呈现的症状,筛选抗口蹄疫病毒单链抗体基因。通过EcoRⅠ/NotⅠ双酶切中间质粒pGEX-ScFv获得单链抗体基因片段,并克隆至反转录病毒载体质粒pFB-neo,构建反转录病毒穿梭载体质粒pFB-ScFv。将pFB-ScFv与辅助质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装重组反转录病毒MMLV-ScFv。同时,构建含增强型绿色荧光蛋白基因的重组反转录病毒MMLV-EGFP作为对照。利用所包装重组反转录病毒感染猪成纤维细胞,通过G418筛选获得携带目的基因的单克隆细胞集落。试验结果表明,本试验在成功构建反转录病毒穿梭载体pFB-ScFv和pFB-EGFP的基础上,获得了分别携带抗口蹄疫病毒单链抗体基因和增强型绿色荧光蛋白基因的反转录病毒,并最终筛选出分别携带上述基因的猪成纤维细胞克隆,为抗口蹄疫病毒转基因动物的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 反转录病毒 单链抗体 猪成纤维细胞 转基因 |
Establishment of the anti-FMDV transgenic pig fibroblasts cell lines |
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| Authors: | SUN Dan-dan LI Xiao WANG Jing YIN Xi-jun KANG Jin-dan LU Yue LI Tai-yuan JIN Ning-yi |
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| Institution: | 1.Agricultural College of Yanbian University,Yanji,Jilin 133002,China;2.Genetic Engineering Laboratory of PLA,Academy of Military Medical Sciences of PLA,Changchun 130122,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FMD retroviruses vectors cell line ScFv porcine fibroblasts cell transgenic |
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