枸杞棉蚜SSR-PCR反应体系的建立与优化

采用单因素法和L_(25)(5~5)正交试验设计进行简单重复系列PCR(SSR-PCR)反应体系优化,并对引物退火温度进行筛选,以建立适宜枸杞棉蚜的SSR反应体系和扩增程序。结果表明,枸杞棉蚜SSR-PCR的优化体系总体积为25μL,包括50 ng模板DNA,1.5U Taq DNA聚合酶,150μmol/L Mg~(2+),300μmol/L d NTPs,0.4 pmol/μL引物,优化后的检测体系更为经济有效;Ago66引物PCR适宜退火温度为58℃。