谷氨酸脱酸酶亲和层析介质制备

将Sepharose 4B用环境氯丙烷活化，接丁二胺臂，再用环氧氯丙烷活化，与谷氨酸的N－2氨基偶联。在N，N－二环己碳化二亚胺催化下，以接臂的胶与谷氨酸的C－5和C－1羧基基团偶联。结果表明，谷氨酸N－2氨基偶联和C－1羧基偶联的亲和介质对小麦谷氨酸脱羧酶有部分亲和作用，洗脱下的酶活低，而谷氨酸C－5羧基基团偶联的层析介质对小麦谷氨酸脱羧酶有完全亲和作用，洗脱的酶活高。谷氨酸能从亲和材料上洗脱掉脱羧酶，但它抑制酶活，而同等浓度的4－氨基丁酸和谷氨酰胺梯度洗脱没有作用。