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牛源多杀性巴氏杆菌主要荚膜群和脂多糖基因型两组三重PCR检测方法
引用本文:李霄阳,许建,刘文晓,章振华,徐福洲,陈小玲,李永清.牛源多杀性巴氏杆菌主要荚膜群和脂多糖基因型两组三重PCR检测方法[J].中国动物检疫,2022,39(1):97-104.
作者姓名:李霄阳  许建  刘文晓  章振华  徐福洲  陈小玲  李永清
作者单位:北京市农林科学院畜牧兽医研究所
基金项目:现代农业产业技术体系北京市奶牛创新团队岗位专家项目(BA1C06-2021);国家重点研发计划重点专项(2016YFD050095)
摘    要:为掌握国内牛源多杀性巴氏杆菌流行的主要荚膜群及脂多糖基因型,建立了检测多杀性巴氏杆菌(Pm)及其A、B荚膜群的三重PCR(PmAB-3PCR)以及检测3个脂多糖基因型的三重PCR(LPS-3PCR)方法,检验了其特异性和敏感性,用感染Pm小鼠的组织和人工污染Pm的牛鼻拭子样品进行了临床模拟检验,并对30株P m进行了PCR检测和传统血清学分型比较。结果显示:PmAB-3PCR特异性好,PmAB-3PCR和LPS-3PCR的DNA检测限分别为10~100 pg和1 ng,二者对菌液的检测限分别为200~2000 CFU和2000~20000 CFU。模拟临床样品PmAB-3PCR检测结果与细菌分离结果100%一致。PmAB-3PCR与琼扩试验的符合率为84%,二者检出的阳性率分别为88%和72%,差异不显著(P>0.05);LPS-3PCR与琼扩试验的符合率为60%,检出的阳性率分别为90%和50%,差异显著(P<0.05)。结果表明,建立的两组三重PCR方法准确高效且重复性好,可取代常规血清学方法用于国内牛巴氏杆菌病的诊断、流调和疫苗株筛选。

关 键 词:牛源多杀性巴氏杆菌  荚膜群  脂多糖基因型  三重PCR  琼脂扩散试验

Two Sets of Triplicate PCR Assays Detecting Major Capsular Serogroups and Lipopolysaccharide Genotypes of Bovine Pasteurella multocida
Li Xiaoyang,Xu Jian,Liu Wenxiao,Zhang Zhenhu,Xu Fuzhou,Chen Xiaoling,Li Yongqing.Two Sets of Triplicate PCR Assays Detecting Major Capsular Serogroups and Lipopolysaccharide Genotypes of Bovine Pasteurella multocida[J].China Journal Of Animal Quarantine,2022,39(1):97-104.
Authors:Li Xiaoyang  Xu Jian  Liu Wenxiao  Zhang Zhenhu  Xu Fuzhou  Chen Xiaoling  Li Yongqing
Institution:(Beijing Key Laboratory for Prevention and Control of Infectious Diseases in Livestock and Poultry,Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Beijing Academy of Agriculturaland Forestry Sciences,Beijing 100097,China)
Abstract:
Keywords:bovine Pasteurella multocida  capsular serogroup  lipopolysaccharide genotype  triplicate PCR  agar diffusion test
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