| 甘蓝型油菜种子特异性表达 fad2基因的ihpRNA载体构建 |
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| 引用本文： | 陈松,张杰夫,陈峰,陈新军,龙卫华,浦惠明,戚存扣.甘蓝型油菜种子特异性表达 fad2基因的ihpRNA载体构建[J].中国油料作物学报,2006,28(3):251-256. |
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| 作者姓名： | 陈松 张杰夫 陈峰 陈新军 龙卫华 浦惠明 戚存扣 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院经济作物研究所,江苏南京210014
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| 基金项目： | 农业部“948”项目(2003-Q4)，江苏省农业科学院基金项目(6110508) |
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| 摘 要： | 旨在通过转基因途径诱导油菜种子中fad2基因发生转录后基因沉默,本文构建了fad2基因的ihpRNA 植物表达载体。通过PCR扩增分离到甘蓝型油菜种子特异性表达的Nap in启动子序列(1147bp)以及油酸脱饱和 酶基因( fad2)的一个537bp的片段,并将它们分别克隆到pGEM - T easy载体中。利用中间载体pHurrican构建 fad2基因的反向重复框。将fad2基因片段以正向的方式连接在一个可剪切的内含子的5’末端,而以反向的方式 连接到该内含子的3’末端;然后将Nap in启动子序列连接到该反向重复框的5’端,而在其3’端接有一个nos终止 子序列;最后将fad2基因的反向重复表达框分两步克隆到植物双元载体pCAMB IA2300的pUC18多克隆位点,构建 具有种子特异性表达的fad2基因的ihpRNA表达载体pCNF IRnos。限制性内切酶酶切对载体作了鉴定分析。
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| 关 键 词： | 甘蓝型油菜 fad2基因 ihpRNA表达载体研究工作。 |
| 文章编号： | 1007-9084（2006）03-0250-06 |
| 收稿时间： | 2005-11-25 |
| 修稿时间： | 2005年11月25 |
Construction of a seed-specific expression ihpRNA vector targeting the fad2 gene of Brassica napus L. |
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| CHEN Song,ZHANG Jie-fu,CHEN Feng,CHEN Xin-jun,LONG Wei-hua,PU Hui-ming,QI Cun-kou.Construction of a seed-specific expression ihpRNA vector targeting the fad2 gene of Brassica napus L.[J].Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2006,28(3):251-256. |
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| Authors: | CHEN Song ZHANG Jie-fu CHEN Feng CHEN Xin-jun LONG Wei-hua PU Hui-ming QI Cun-kou |
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| Institution: | Instltute of Industrial Crops ,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences ,Nanjing 210014, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brassica napus L fad2 gene ihpRNA expression vector |
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