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| 猪流行性腹泻病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用 | |
| 作者单位： | ;1.贵州大学动物科学学院;2.贵州省动物疫病预防控制中心;3.贵州省贵阳市农业委员会;4.贵州省生猪质量安全工程技术研究中心 |
| 摘 要： | 针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因设计LAMP引物,对反应体系的条件优化并进行特异性及敏感性等试验。结果显示:该方法在60℃下恒温扩增60min,使PEDV的M基因得到了高效率特异性扩增。本试验方法特异性好,与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)及猪伪狂犬病病毒(PRV)等无交叉反应,同时也具有较好的灵敏性,最低检测分子拷贝数为1.0×102 copies/μL。反应结束后加入SYBR GreenⅠ在紫外灯下观察颜色变化,结果显示阳性扩增产物呈现绿色荧光。结果表明:该LAMP检测方法特异性强,灵敏度高,操作便捷,适于临床检测PEDV。 |
| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 RT-LAMP M基因 |
Establishment and application of reverse transcription loop-mediated isothermal amplification method for detection of porcine epidemic diarrhea virus |
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