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| 猪肺泡巨噬细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.内蒙古民族大学动物科学技术学院 |
| 摘 要： | 为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)与猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)蛋白质间相互的作用,本研究使用SMART技术成功构建了猪肺泡巨噬细胞酵母双杂交cDNA文库。首先提取PAM总RNA,使用SMART RACE法经LD PCR合成双链cDNA,运用SMART技术,通过同源重组的方法将双链cDNA与pGADT7-Rec质粒共转化进酵母Y187感受态,再利用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选阳性克隆,最终构建的文库滴度达到了6.96×10~7 CFU/mL,重组率初步计算达到95%,插入片段范围在200~2 000bp。本研究为PRRSV致病蛋白的筛选以及相关疾病的研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 猪肺泡巨噬细胞 PRRSV SMART技术 酵母双杂交cDNA文库 同源重组 |
Construction and characterization of yeast two-hybrid cDNA library of porcine alveolar macrophages |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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