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副猪嗜血杆菌菌体蛋白的提取及蛋白质双向电泳方法建立
作者单位:
;1.广西兽医研究所;2.广西畜禽疫苗新技术重点实验室
摘 要:
为了建立副猪嗜血杆菌菌体蛋白的双向电泳方法,获得背景清晰、蛋白分辨率高的双向电泳图,对细菌裂解方法、蛋白上样量、IPG胶条选择等关键步骤进行优化。结果显示,采用超声(9.9 s/停顿9.9 s,200 W)冰浴破碎细菌,5 min后,裂解液溶解沉淀,4℃过夜裂解提取菌体蛋白,以0.6 mg菌体蛋白上在p H值3~10非线性IPG胶条上进行电泳,最后考马斯亮蓝G250染色,获得的蛋白质点清晰,效果最好,随机挑取14个蛋白点进行质谱鉴定,证实均为副猪嗜血杆菌菌体蛋白。
关 键 词:
副猪嗜血杆菌
双向电泳
菌体蛋白
蛋白质组学
Establishment of two-dimensional electrophoresis assay for proteome analysis of Haemophilus parasuis
Abstract:
Keywords:
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