摘 要: | 本试验目的是构建转基因莱茵衣藻,用于鱼类口服疫苗的应用。通过提取传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)-G蛋白RNA进行扩增,将其克隆到p MD18T并与p Chlamy-4载体相连,重组得到莱茵衣藻并提取总蛋白,将重组的总蛋白通过给小鼠灌胃并利用流式细胞仪测其免疫指标评价其安全效应。结果:扩增片段长度为1 500 bp,经SDS-PAGE电泳得到1条大约为58 k Da的蛋白条带,Westen Blot分析结果显示,重组莱茵衣藻表达的蛋白可以与6×HIS标签抗体特异性结合,具有良好的反应原性;流式细胞仪检测结果显示,灌胃转基因莱茵衣藻组CD4~+、CD8~+T淋巴细胞含量都有所增加,小鼠未出现死亡。表明转基因莱茵衣藻构建成功。其安全性稳定,可以用于鱼类口服疫苗的推广使用。
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