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牛传染性鼻气管炎gE基因TaqMan-MGB与SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立及应用
引用本文:袁浩芳,朱晓晖,张雨,李焱,李可伟,胡剑武,李家奎.牛传染性鼻气管炎gE基因TaqMan-MGB与SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2023(11):110-116.
作者姓名:袁浩芳  朱晓晖  张雨  李焱  李可伟  胡剑武  李家奎
作者单位:1. 华中农业大学动物科学技术学院动物医学院;2. 西藏自治区农业农村厅兽医局
基金项目:国家肉牛牦牛产业技术体系项目(CARS-37);
摘    要:为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的荧光定量检测方法,本研究根据IBRV gE基因的序列设计了相应的探针和引物,分别建立TaqMan-MGB探针和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,并对2种方法进行了综合比较。结果显示,TaqMan-MGB探针和SYBR GreenⅠ定量荧光PCR方法的灵敏度分别达到1.0×101 copies/μL和1.0×102 copies/μL;2种荧光定量方法对除IBRV的其他牛病毒和细菌检测结果均为阴性;重复性检测中变异系数均小于2.3%;检测了130份来自西藏的牦牛样品,2种荧光定量PCR阳性检出率均为100%。以上结果表明,2种荧光定量方法都可用于检测IBRV,且TaqMan-MGB荧光定量PCR敏感性高于SYBR GreenⅠ荧光定量PCR。

关 键 词:牛传染性鼻气管炎病毒  TaqMan-MGB荧光定量PCR  SYBR  GreenⅠ荧光定量PCR
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