Smad7介导TGF-β信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞增殖的影响 |
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引用本文: | 郭泽媛,杜张胜,张雅琦,陈春路,马晓燕,成颖,王锴,吕丽华.Smad7介导TGF-β信号通路对绵羊卵泡颗粒细胞增殖的影响[J].中国农业科学,2023(13):2597-2608. |
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作者姓名: | 郭泽媛 杜张胜 张雅琦 陈春路 马晓燕 成颖 王锴 吕丽华 |
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作者单位: | 山西农业大学动物科学学院 |
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基金项目: | 山西省现代农业产业技术体系建设专项资金; |
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摘 要: | 【目的】卵泡发育是一个复杂的调控过程,其中绵羊卵泡颗粒细胞(granulosa cells, GCs)的增殖,分化会直接影响卵泡的发育状况。TGF-β信号通路在绵羊卵巢发育和卵泡生长过程中起着重要作用,Smad7作为TGF-β信号通路关键性的抑制基因也发挥重要作用,通过探究Smad7介导TGF-β信号通路对绵羊卵泡GCs增殖凋亡的影响,为进一步研究Smad7在卵泡GCs增殖凋亡过程中的调控作用提供依据。【方法】选取4—6月龄未怀孕的晋中健康杜湖杂交母羊20只,屠宰后采集双侧卵巢组织,分离培养卵泡颗粒细胞,FSHR细胞免疫荧光鉴定,Smad7细胞免疫荧光的表达定位,CCK8法测定细胞增殖情况,绘制生长曲线;细胞传代后外源添加不同浓度Smad7激动剂积雪草苷(asiaticoside,AS)(0、100、200、400、600 ng·mL-1)培养绵羊卵泡GCs,选择AS最佳作用浓度处理二代颗粒细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测TGF-β信号通路中关键基因及细胞凋亡和周期相关基因表达水平;合成3个siSmad7,转染至卵泡GCs中,选择干扰效果最佳的,采用实...
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关 键 词: | 积雪草苷 siRNA Smad7 TGF-β信号通路 绵羊 颗粒细胞 |
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