| 摘 要： | 柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是一种严重危害养鸡业健康发展的高致病性原虫，致密颗粒蛋白(dense granule proteins, GRAs)是顶复合器门原虫胞内寄生重要功能蛋白，具有较高的免疫学应用价值，然而目前尚未有关于球虫致密颗粒蛋白的确切报道。为发掘柔嫩艾美耳球虫GRAs并研究其功能，采用生物信息学、分子生物学、免疫学等技术从E.tenella北京株中鉴定到2种假定致密颗粒蛋白(hypothetical dense granule protein, hEtGRA)hEtGRA12、hEtGRA9,并用纯化后的蛋白分别免疫小鼠制备多克隆抗体，用ELISA、Western blot方法检测2种蛋白的抗原性。分子克隆结果表明，hEtGRA12、hEtGRA9基因编码区长度分别为1 188、1 110 bp,分别编码395、369个氨基酸，与其他顶复合器门原虫致密颗粒蛋白GRA12、GRA9物种间相似性分别为28.8%～39.6%、27.5%～29.5%;SDS-PAGE结果显示，重组蛋白rhEtGRA12、rhEtGRA9条带大小分别为63.6、67.0 ku;...
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