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鸡传染性支气管炎和禽衣原体病的多表位DNA疫苗构建及其免疫原性研究
作者姓名:扈立伟  任君  卢宝平  刘青  朱凡杰  顾天越  包利霞  刘婷婷  王鑫源  朱晓琛  张东超  金天明
作者单位:1. 天津农学院动物科学与动物医学学院,天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室;2. 天津农学院动物科学与动物医学学院,天津市畜禽病原检测与基因工程疫苗工程技术中心;3. 天津市农业科学院,天津市畜禽分子育种与生物技术重点实验室
基金项目:甘肃省科技计划项目(22CX8NL215);;国家自然科学基金青年基金项目(32202760);
摘    要:试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示:构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高(P<0.01),与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGF...

关 键 词:鸡传染性支气管炎病毒  鹦鹉热衣原体  S1基因  MOMP基因  表位疫苗
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