| 沙棘油脂合成关键基因GPD1和DGAT的克隆及功能验证 |
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| 引用本文： | 赵思阳,阮成江,丁健,卢顺光,温秀凤,胡建忠.沙棘油脂合成关键基因GPD1和DGAT的克隆及功能验证[J].中南林业科技大学学报,2023(8):149-158+168. |
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| 作者姓名： | 赵思阳 阮成江 丁健 卢顺光 温秀凤 胡建忠 |
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| 作者单位： | 1. 大连民族大学资源植物研究所;2. 水利部沙棘开发管理中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（32071799,32111540255,32261133521）； |
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| 摘 要： | 【目的】沙棘是水土保持和防沙治沙的重要木本油料树种，种子油富含生物活性成分，种子含油率低是制约沙棘开发和利用的主要瓶颈。本研究通过克隆沙棘种子油脂合成关键基因GPD1(glycerol-3-phosphate dehydrogenase)、DGAT1(diacylglycerol acyltransferase 1)和DGAT2(diacylglycerol acyltransferase 2)，并进行了拟南芥异源过表达，以期为高油沙棘培育提供科学依据。【方法】基于沙棘转录组测序结果，以沙棘种子c DNA为模板克隆HrGPD1、HrDGAT1和HrDGAT2基因，通过In-fusion连接技术构建pCAMBIA1300-mCherry表达载体，通过农杆菌介导法将表达载体转入农杆菌GV3101，采用农杆菌蘸花法获取过表达油脂合成关键基因的拟南芥植株。利用实时荧光定量qRT-PCR分析HrGPD1、HrDGAT1和HrDGAT2在转基因拟南芥中的表达情况，利用氯仿甲醇法对T2代转基因和野生型的拟南芥进行含油量检测。【结果】通过PCR技术扩增得到了正确的HrGPD1、HrDGAT1和HrDG...
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| 关 键 词： | 沙棘 油脂合成 关键基因 过表达 含油量 |
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