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禽流感病毒T细胞表位与体外重建鸡MHC Ⅰ类分子结合试验
引用本文:李新生,陈红英,闫若潜,高凤山,方勤美,夏春.禽流感病毒T细胞表位与体外重建鸡MHC Ⅰ类分子结合试验[J].畜牧兽医学报,2007,38(12):1335-1340.
作者姓名:李新生  陈红英  闫若潜  高凤山  方勤美  夏春
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;中国农业大学动物医学院,农业部预防兽医学重点实验室,北京,100094
2. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
3. 河南省兽医防治站,郑州,450002
4. 大连大学,大连,116622
5. 中国农业大学动物医学院,农业部预防兽医学重点实验室,北京,100094
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371098)
摘    要:为探讨体外重建的MHCⅠ复合体BF2-linker-β2m鉴定病毒抗原肽系统能否在体外结合抗原多肽,以及不同类的MHCⅠ类分子结合相同和不同抗原多肽表位能力的差异,本研究采用人工合成的禽流感病毒的3条多肽,猪口蹄疫病毒的2条多肽,以及来源于草鱼呼肠孤病毒的2条多肽分别与4类体外重建的串联鸡MHCⅠ类分子复合体BF2-linker-β2m进行了体外结合试验。BF2-linker-β2m与不同的病毒抗原九肽按照1:10的摩尔比进行混合,作用后取反应混合物离心除去未与MHCⅠ类分子结合的抗原多肽;然后取BF2-linker-β2m分别与抗原多肽形成的复合体,利用酸洗法将结合的多肽白MHCⅠ类分子的抗原多肽结合槽中洗脱,洗脱后的蛋白和多肽混合物离心收集洗脱的多肽溶液,随后利用C18柱对洗脱的多肽进行去盐、脱酸处理;将多肽样品冻干,用基质溶解后直接点样进行一级质谱(MS)和二级质谱(MSMS)测定,结果表明,3类体外重建的BF2-linker-β2m可与禽流感病毒多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV结合,而不与禽流感病毒多肽TIGECPKYV以及猪口蹄疫病毒和草鱼呼肠孤病毒的4条多肽结合。证实由于MHCⅠ类分子的多态性导致复等位基因的MHCⅠ类分子结合病毒抗原表位的能力存在差异;病毒的T细胞抗原表位是MHCⅠ类分子限制性的;KILTIYSTV和LLLAIVsLV是禽流感病毒的候选表位。

关 键 词:  MHC  Ⅰ类分子  T细胞表位  质谱
文章编号:0366-6964(2007)12-1335-06
收稿时间:2007-02-18
修稿时间:2007年2月18日

Study on Avian Influenza Virus T Cell Epitopes Binding with Reconstructed Chicken MHC Ⅰ Molecules in vitro
LI Xin-sheng,CHEN Hong-ying,YAN Ruo-qian,GAO Feng-shan,FANG Qin-mei,XIA Chun.Study on Avian Influenza Virus T Cell Epitopes Binding with Reconstructed Chicken MHC Ⅰ Molecules in vitro[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(12):1335-1340.
Authors:LI Xin-sheng  CHEN Hong-ying  YAN Ruo-qian  GAO Feng-shan  FANG Qin-mei  XIA Chun
Abstract:
Keywords:
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