| 长春花ISSR-PCR 反应体系的正交优化 |
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| 引用本文： | 刘峰,顾志敏,陈析丰,金杨,马伯军.长春花ISSR-PCR 反应体系的正交优化[J].安徽农业科学,2010,38(5):2261-2263,2267. |
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| 作者姓名： | 刘峰 顾志敏 陈析丰 金杨 马伯军 |
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| 作者单位： | 浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004;浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004;浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004;浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004;浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30771329);;浙江省科技厅重点项目(2007C22063) |
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| 摘 要： | 目的]筛选最适的长春花ISSR-PCR反应体系。方法]采用正交试验方法,对影响长春花ISSR-PCR反应体系的引物浓度、dNTP浓度、Mg2＋浓度、TaqDNA聚合酶浓度和模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行正交试验,建立适合长春花ISSR-PCR的反应体系。结果]长春花ISSR-PCR反应体系的最佳条件：引物浓度0.50μmol/L,dNTP浓度0.10 mmol/L,Mg2＋浓度3.00 mmol/L,Taq酶浓度0.75U/25μl,DNA模板浓度350 ng/25μl。采用该反应体系筛选出12对适合于长春花ISSR-PCR反应的引物。结论]利用优化系统进行长春花的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果。
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| 关 键 词： | 长春花 ISSR-PCR 正交设计 引物筛选 |
Research on the Orthogonal Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Madagascar Periwinkle |
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| LIU Feng et al.Research on the Orthogonal Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Madagascar Periwinkle[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2010,38(5):2261-2263,2267. |
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| Authors: | LIU Feng |
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| Institution: | Zhejiang Normal University;Chemistry and Life Science;Jinhua;Zhejiang 321004 |
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| Abstract: | Objective] The optimal ISSR-PCR reaction system of madagascar periwinkle(Catharanthus roseus) was screened.Method] The suitable ISSR-PCR reaction system of madagascar periwinkle was established through the study on the effect of the concentration of primers,dNTP concentration,Mg2+ concentration,Taq DNA polymerase and template DNA concentration on the ISSR-PCR reaction system with the orthogonal test method with four levels.Result] The best condition of the ISSR-PCR reaction system was follows:the concent... |
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| Keywords: | Madagascar periwinkle ISSR-PCR Orthogonal design Primer screening |
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