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OsRUS1酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测
引用本文:潘家强,侯学文.OsRUS1酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测[J].热带作物学报,2012,33(1):107-110.
作者姓名:潘家强  侯学文
作者单位:1. 华南农业大学生命科学学院分子植物生理研究室,广东广州,510642
2. 华南农业大学生命科学学院分子植物生理研究室,广东广州510642;华南农业大学生命科学学院植物功能基因组与生物技术重点实验室,广东广州510642
基金项目:国家自然科学基金“水稻OsRUS基因家族在UV-B信号传导中的功能研究”(No. 30971709)。
摘    要:采用PCR技术扩增水稻(Oryza sativa L)根UV-B敏感基因1(ROOT UV-B SENSITIVE 1,RUS1)四个不同片段OsRUS1(1-1782)、OsRUS1(1-504)、OsRUS1(510-1282)、OsRUS1(1188-1782)],连接到T载体pMD18-T-Simple上,测序无误后分别亚克隆到诱饵载体pGBKT7上,酶切和测序结果表明构建的4个OsRUS1基因片段的诱饵载体构建成功,读码框正确;转化重组载体于酵母感受态细胞Y187中,用LacZ、MEL1活性检测法和营养缺陷型培养基SD-Trp-DO培养法进行自激活检测和毒性检测,结果表明诱饵载体对酵母菌株Y187没有转录激活活性和毒害作用。说明构建的4个OsRUS1基因片段的诱饵载体可以用于酵母双杂交系统中,为下一步从水稻cDNA文库中筛选互作蛋白奠定了基础。

关 键 词:水稻根对UVB敏感基因  诱饵载体  酵母双杂交  自激活  毒性检测

Construction of OsRUS1 Yeast Two-Hybrid Bait Vectors and Detection of Their Self-activated Activity
PAN Jiaqiang and HOU Xuewen.Construction of OsRUS1 Yeast Two-Hybrid Bait Vectors and Detection of Their Self-activated Activity[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2012,33(1):107-110.
Authors:PAN Jiaqiang and HOU Xuewen
Institution:1,2 1 Lab of Molecular Plant Physiology,College of Life Sciences,South-China Agricultural University, Guangzhou,Guangdong 510642,China 2 Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Biotechnology,College of Life Sciences,South-China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642,China
Abstract:
Keywords:
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