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重瓣茶花‘红十八学士’MADS-box家族B-function基因序列分析与原核表达
引用本文:朱高浦,李纪元,范正琪,倪穗,李辛雷,周兴文,孙迎坤.重瓣茶花‘红十八学士’MADS-box家族B-function基因序列分析与原核表达[J].热带作物学报,2012,33(6):1077-1083.
作者姓名:朱高浦  李纪元  范正琪  倪穗  李辛雷  周兴文  孙迎坤
作者单位:1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳 311400;中国林业科学研究院经济林研究开发中心,河南郑州 450003
2. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳,311400
3. 宁波大学海洋学院,浙江宁波,315211
基金项目:科技部国际合作项目(No. 2011DFA30490); “十二五”国家科技支撑计划课题(No. 2012BAD01B0703); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(No. RISF6141)。
摘    要:对山茶重瓣花‘红十八学士’(Camellia japonica‘Hong Shibaxueshi’)中的4个B类功能基因构建了系统进化树,预测了其蛋白结构,并构建了相应的原核表达载体.生物信息学分析结果表明:4个基因分属3个亚家族,其中CjHGLO1和CjHGLO2属PI亚家族,CjHTM6属TM6-1ike亚家族,CjHDEF属AP3亚家族;4个基因的编码蛋白均为不稳定蛋白,均无信号肽存在;其蛋白二、三级结构均以α-螺旋为主,其次是无规则卷曲,然后以延伸链三种构象形式存在;分析的特定位点中磷酸化位点数量最多,尤其是蛋白激酶C磷酸化位点最多.原核表达实验结果显示:当IPTG浓度在0.2 mmol/L、30℃、经1h诱导CjHGL01蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.1 mmol/L、30℃、诱导1.5 h CjHGLO2蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.5 mmol/L、16℃、过夜(>16 h)诱导CjHDEF蛋白可获表达;当IPTG浓度在0.3 mmol/L、20℃、诱导5 h CjHTM6蛋白可获表达.这些研究为山茶B-function基因的更深入研究奠定了基础.

关 键 词:重瓣  山茶花  B-function基因  生物信息学分析  原核表达
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