| 转基因741杨原生质体游离与纯化研究 |
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| 引用本文： | 张旭,王桂英,朱建锋,郑克举,王进茂.转基因741杨原生质体游离与纯化研究[J].河北林果研究,2012,27(4):358-362. |
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| 作者姓名： | 张旭 王桂英 朱建锋 郑克举 王进茂 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学林学院,河北保定,071001
2. 河北农业大学林学院,河北保定071001;廊坊市农林科学院,河北廊坊06500
3. 河北农业大学林学院,河北保定071001;河北省林木种质资源与森林保护重点实验室,河北保定071001 |
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| 基金项目： | 河北省自然科学基金(C2008000279);国家高技术研究发展计划“863”计划(2011AA100201) |
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| 摘 要： | 以转双抗虫基因741杨无菌苗叶片为材料,对叶片原生质体游离、纯化方法及影响因素等进行了分析研究.结果表明,上部叶片产量和活力均高于其他叶位,在实验的浓度范围之内,Macerozyme R-10(离析酶)、Cellulase Onozuka R-10(纤维素酶)、Driselase (Sigma)(崩溃酶)对原生质体的产量和活力无显著影响.适宜转双抗虫基因741杨叶片原生质体游离与纯化的条件为无菌苗上部叶片为材料,0.7 mol/L甘露醇的CPW盐溶液预质壁分离1～1.5 h CPW+0.5％ Macerozyme R-10+0.25％ CellulaseOnozuka R-10+0.025％ Driselase (Sigma)+ 0.5 mol/L甘露醇(pH 5.7),酶解温度27℃,酶解时间10 h,用“过滤-离心-漂浮法”纯化原生质体.
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| 关 键 词： | 转双抗虫基因741杨 原生质体 游离 纯化 |
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