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人干细胞因子(SCF)5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定
引用本文:谭运年,谭文斌,彭兴华.人干细胞因子(SCF)5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定[J].湛江医学院学报,2001,19(1):6-9.
作者姓名:谭运年  谭文斌  彭兴华
作者单位:[1]广东医学院附属医院妇产科研究室,广东湛江524001 [2]湖南医科大学分子生物学研究中心,湖南长沙410078
基金项目:国家自然基金项目资助!(No.3970 0 0 5 0 )
摘    要:目的:为研究人干细胞因子(SCF)5’旁侧1.42kb区域内不同序列对全长cDNA在真核细胞中表达的调控作用,构建了SCF5’旁侧1.42kb的调控序列与其1.2kb的全长cDNA融合克隆。方法:将PCR获得的SCF5'旁侧1.42kb的调控序列与RT-PCR获得的其1.2kb的全长cDNA克隆入pGEM—T载体,筛选正确插入方向,利用合适的限制性内切酶从中切出三个片段依次亚克隆入pUC19克隆载体中。结果:获得了SCF5'旁侧1.42kb的调控序列与其1.2kb的全长cDNA并成功地构建了它们的融合克隆。结论:T-载体在克隆添加了少量具有3’→5’外切核酸酶的PCR产物中仍然有效;在稍大片段的基因克隆操作中,利用分段亚克隆的方法,避开干扰另外的酶切位点,依次分段亚克隆更为可行。

关 键 词:人干细胞因子  调控序列  cDNA  融合克隆
修稿时间:2000年7月17日

Construction and identification of the fusion clone of the SCF 5’flanking sequence and its full-length cDNA
TAN Yun-nian,TAN Wen-bin,PENG Xing-hua.Construction and identification of the fusion clone of the SCF 5’flanking sequence and its full-length cDNA[J].Journal of Guangdong Medical College,2001,19(1):6-9.
Authors:TAN Yun-nian  TAN Wen-bin  PENG Xing-hua
Abstract:
Keywords:human  stem  cell  factor  regulation  sequence  cDNA  fusion  clone
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