孕酮对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、TLR4、CD14和MD2的影响 |
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作者姓名: | 曹荣峰 崔晓妮 张乃生 |
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作者单位: | [1]青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109 [2]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 |
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基金项目: | 山东省教育厅高等学校科技计划资助项目(J10LC03) |
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摘 要: | 先分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经差速贴壁法纯化后,随机分为6组:空白对照组、0.5mg/L脂多糖(LPS)组、10-6 mol/L孕酮(P4)组、LPS+10-5 mol/L P4组、LPS+10-6 mol/L P4组、LPS+10-7 mol/L P4组。各组在处理12、24h分别提取上清液,ELISA法测TNF-α和IL-1β的含量;各组在处理24h分别提取细胞总RNA,用RT-PCR法测TLR4、CD14、MD2mRNA的表达。结果显示,处理12、24h,0.5mg/L LPS组TNF-α和IL-1β的含量均极显著高于对照组(P〈0.01);10-6 mol/L P4组与对照组差异不显著(P〉0.05);LPS+10-5 mol/L P4组极显著低于对照组(P〈0.01);LPS+10-6 mol/L P4组显著低于对照组(P〈0.05);而LPS+10-7 mol/L P4组TNF-α的表达差异不显著(P〉0.05),IL-1β的表达差异显著(P〈0.05)。说明P4可降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,且呈剂量依赖关系。LPS单独处理,TLR4和CD14mRNA的表达极显著高于对照组(P〈0.01);10-6 mol/L P4单独处理与对照组无显著差异(P〉0.05);分别添加1-5、10-6、10-7 mol/L P4组均极显著降低LPS诱导TLR4和CD14mRNA的表达(P〈0.01),而MD2mRNA的表达差异不显著(P〉0.05)。说明P4可极显著降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和CD14mRNA表达,但对MD2mRNA表达影响不显著。结果显示,P4能抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,此过程与细胞TLR4和CD14表达下降相关,而与MD2的表达无关。
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关 键 词: | 孕酮 腹腔巨噬细胞 早期炎性因子 Toll样受体4 |
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