| 传染性法氏囊病病毒VP5蛋白跨膜区的敲除及可溶性原核表达研究 |
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| 引用本文： | 严孝金,李锋,秦立廷,李倩倩,韩翠晓,冯舵,王笑梅,高伟. 传染性法氏囊病病毒VP5蛋白跨膜区的敲除及可溶性原核表达研究[J]. 安徽农业科学, 2011, 0(17): 10461-10463 |
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| 作者姓名： | 严孝金 李锋 秦立廷 李倩倩 韩翠晓 冯舵 王笑梅 高伟 |
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| 作者单位： | 北京林业大学理学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30970578,31070651); 教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目(NECT-08-0731) |
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| 摘 要： | [目的]构建敲除传染性法氏囊病病毒（IBDV）VP5蛋白跨膜区序列的原核表达载体，并进行目的蛋白的表达、分离和纯化。[方法]利用PCR技术分别扩增IBDVVP5基因的胞外片段和胞内片段，然后将2个片段及pET-28b（＋）同时相接，即载体一胞内片段一胞外片段一载体，构建了敲除跨膜区基因片段的VP5重组表达质粒pET—VP5-FC及改进后的pET—VP5-SC。将表达质粒转化BL21（DE3），IPrG诱导后经Ni亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组蛋白。[结果]得到可溶性表达的IBDVVP5。[结论]为进一步研究VP5蛋白的结构与功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 传染性法氏囊病病毒 VP5 跨膜区敲除 原核表达 |
Knockout of IBDV VP5 Protein Transmembrane Region and the Soluble Prokaryotic Expression Research |
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| YAN Xiao-jin et al. Knockout of IBDV VP5 Protein Transmembrane Region and the Soluble Prokaryotic Expression Research[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2011, 0(17): 10461-10463 |
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| Authors: | YAN Xiao-jin et al |
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| Affiliation: | YAN Xiao-jin et al(College of Science,Beijing Forestry University,Beijing 100083) |
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| Abstract: | [Objective] To construct the prokaryotic expression vector of IBDV VP5 protein whose transmembrane region sequence was knocked out.Moreover,the expression,separation and purification of objective protein were carried out.[Method] PCR technology was used to respectively amplify the extracellular and intracellular fragments of IBDV VP5 gene.Then,the two fragments were simultaneously linked to pET-28b(+),and it was the vector-intracellular fragment-extracellular fragment-vector.The recombinant expression vecto... |
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| Keywords: | IBDV VP5 Transmembrane region knockout Prokaryotic expression |
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