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河北地区猪圆环病毒二型ORF2基因片段的克隆与原核表达
引用本文:张秀珊,曹洪战,张丽青,刘涛,陈赛娟,孙继国.河北地区猪圆环病毒二型ORF2基因片段的克隆与原核表达[J].华北农学报,2008,23(4).
作者姓名:张秀珊  曹洪战  张丽青  刘涛  陈赛娟  孙继国
作者单位:河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000;河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000
摘    要:以PCV2 PK-15细胞毒提取的DNA为模板,用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600 bp片段;对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化,经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-32a-ORF2,转入大肠埃希氏菌B121(DE3)中,以IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳和Western-Blotting分析.结果表明.重组表达质粒在大肠中所表达的融合蛋白相对分子量为40 kDa,Western-blotting分析表明该蛋白具有PCV2抗原性.

关 键 词:猪圆环病毒二型  ORF2基因片段  克隆  原核表达

Cloning and Expressing of the Fragment of Porcine Circovirus2 ORF2 Gene
ZHANG Xiu-shan,CAO Hong-zhan,ZHANG Li-qing,LIU Tao,CHEN Sai-juan,SUN Ji-guo.Cloning and Expressing of the Fragment of Porcine Circovirus2 ORF2 Gene[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2008,23(4).
Authors:ZHANG Xiu-shan  CAO Hong-zhan  ZHANG Li-qing  LIU Tao  CHEN Sai-juan  SUN Ji-guo
Abstract:
Keywords:
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