瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

试验旨在明确瘦素在妊娠和非妊娠绵羊子宫内膜组织中的定位特征，探究其对绵羊子宫内膜上皮细胞中胚胎附植的影响。使用免疫组化法检测瘦素及其受体在妊娠和未妊娠绵羊的子宫内膜上皮组织的表达及定位；利用组织块分离培养原代绵羊子宫内膜上皮细胞，CCK8法确定瘦素最适浓度，RT-qPCR和Western blot检测瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞凋亡的作用，细胞划痕试验检测瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞迁移的作用，RT-qPCR检测瘦素对胚胎附植相关因子血管内皮生长因子（VEGF）、白血病抑制因子（LIF）、白细胞介素-6(IL-6)、子宫内膜附植位点黏蛋白（Muc1）、基质金属蛋白9(MMP9)、白细胞介素-1β(IL-1β)、骨桥蛋白（OPN）、泛素样修饰因子（ISG15）等基因mRNA的表达情况。结果显示，瘦素蛋白主要表达在未妊娠绵羊子宫内膜的基质和上皮组织中，主要在妊娠绵羊子宫内膜上皮组织中表达，瘦素受体表达无明显变化；组织块法可成功获得具有典型上皮样细胞特征并表达角蛋白CK18的原代绵羊子宫内膜上皮细胞。250 mg/L瘦素促进绵羊子宫内膜上皮细胞增殖和迁移，并显著上调Bcl-2，下调BAX、Cas...