| Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632对猪诱导多能干细胞冻存和传代效率的影响 |
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| 引用本文： | 成德,高星,李珍珍,高祎,刘亚军,鲍建昌,王华岩. Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632对猪诱导多能干细胞冻存和传代效率的影响[J]. 农业生物技术学报, 2012, 0(7): 726-734 |
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| 作者姓名： | 成德 高星 李珍珍 高祎 刘亚军 鲍建昌 王华岩 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,陕西省干细胞工程技术研究中心 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)项目(No.2009CB941002;No.2011CBA01002) |
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| 摘 要： | 猪作为重要的疾病模型动物,目前猪诱导多能干细胞(iPS 细胞)已有建系,但是细胞的冻存和传代的效率较低,影响后续的实验研究。Rho 相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂 Y-27632 可提高人胚胎干细胞的解冻存活率,促进其克隆形成。本实验以猪(Sus scrofa)iPS 细胞为研究对象,通过在猪 iPS 细胞冻存和解冻过程中添加Y-27632,发现其可以减少猪 iPS 细胞在冻存和解冻复苏过程中的凋亡。在细胞的传代过程中,使用 Y-27632 可以促进猪 iPS 细胞的贴壁和克隆形成。虽然高浓度 Y-27632 会对猪 iPS 克隆的形态产生一定的影响,但并未影响细胞的碱性磷酸酶(AP)活性和多能性基因 Oct4、Sox2 和 Nanog 的表达水平。最后将转座子报告质粒 PB[Act-RFP]DS 导入猪 iPS 细胞中,经流式筛选后得到的带有红色荧光的细胞,并将其注射于猪孤雌胚胎中进行发育能力检测,发现 Y-27632 的处理能减少细胞在流式筛选和胚胎注射中的凋亡,促进其在胚胎内的嵌合发育。研究结果说明,ROCK 抑制剂 Y-27632 可以提高猪 iPS 细胞冻存和传代的效率,促进其在胚胎中的嵌合。该研究有助于猪 iPS 细胞及其他多能干细胞的保存,传代和筛选等相关研究。
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| 关 键 词： | Y-27632 猪诱导多能干细胞(iPS 细胞) Rho相关蛋白激酶(ROCK) 冻存 凋亡 |
Effected of Rho-associated Protein Kinase Inhibitor Y-27632 on Improving the Cryopreserved Survival and Passage of Porcine(Sus scrofa) Induced Pluripotent Stem Cells |
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| CHENG De,GAO Xing,LI Zhen-Zhen GAO Yi,LIU Ya-Jun BAO Jian-Chang WANG Hua-Yan. Effected of Rho-associated Protein Kinase Inhibitor Y-27632 on Improving the Cryopreserved Survival and Passage of Porcine(Sus scrofa) Induced Pluripotent Stem Cells[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2012, 0(7): 726-734 |
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| Authors: | CHENG De GAO Xing LI Zhen-Zhen GAO Yi LIU Ya-Jun BAO Jian-Chang WANG Hua-Yan |
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| Affiliation: | College of Veterinary Medicine, Shaanxi Center for Stem Cell Engineering and Technology, Northwest Agriculture and Forestry University, Yangling 712100, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Y-27632 Porcine induced pluripotentstem cells(iPS cells) Rho-associated protein kinase(ROCK) Cryopreservation Apoptosis |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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