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大白菜耐旱相关基因BpNFYA5 的克隆及功能初步分析
引用本文:黄人卉,王桂香,刘凡. 大白菜耐旱相关基因BpNFYA5 的克隆及功能初步分析[J]. 园艺学报, 2012, 39(8): 1501-1510
作者姓名:黄人卉  王桂香  刘凡
作者单位:(1 首都师范大学生命科学学院,北京 100089;2 北京市农林科学院蔬菜研究中心,农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京 100097)
基金项目:北京市农林科学院科技创新能力建设项目
摘    要: 以拟南芥(Arabidopsis thaliana)NFYA5 基因(GenBank 登录号:At1g54160)的序列为基准,通过比对获得芸薹属大白菜[Brassica campestris L. ssp. pekinensis(Lour.)Makino]同源EST 序列;采用电子克隆的方法从大白菜中克隆到相关基因全长序列,命名为BpNFYA5。该基因包含3 个内含子,其推导蛋白与拟南芥NFYA5 CCAAT-box 结合域相似性达92.6%。对大白菜进行干旱胁迫,发现BpNFYA5显著上调表达。构建了植物过表达载体pBIn-NFYA5 和RNA 干扰载体pFGC-NFYA5,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导浸花法转化拟南芥。经除草剂、潮霉素筛选及PCR 鉴定获得转基因植株。采用干旱和10% PEG6000 模拟亏水胁迫,对转基因材料的T2 代进行了耐旱性鉴定。结果显示:过表达植株(OL)较野生型植株(WT)和干扰表达植株(Ri)叶绿素含量高;渗透胁迫下OL 植株脯氨酸含量迅速积累,积累量显著高于WT 和Ri 植株;控水干旱2 周OL 株系较WT 及Ri 材料具有更好的干旱耐受性;OL 株系离体叶片的失水速率较小,叶片有效水分利用率较WT 和Ri 高。结果表明所克隆的基因BpNFYA5 在亏水胁迫调控中具有抗旱作用。

关 键 词:大白菜  拟南芥  BpNFYA5  基因  抗旱性  功能

Cloning and Functional Analysis of a Drought-responsive Gene BpNFYA5 from Chinese Cabbage
HUANG Ren-hui,WANG Gui-xiang,and LIU Fan. Cloning and Functional Analysis of a Drought-responsive Gene BpNFYA5 from Chinese Cabbage[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2012, 39(8): 1501-1510
Authors:HUANG Ren-hui  WANG Gui-xiang  and LIU Fan
Affiliation:(1School of Life Sciences,Capital Normal University,Beijing 100089,China;2Beijing Vegetable Research Centre,Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops(North China),Ministry of Agriculture,Beijing 100097,China)
Abstract:
Keywords:Chinese eabbage  Arabidopsis  BpNFYA5  gene  drought-tolerance
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