| 基于酵母同源重组的转录因子活性分析 |
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| 引用本文： | 裴浩,李万通,周逍灵,余敏,陶芳. 基于酵母同源重组的转录因子活性分析[J]. 安徽农业大学学报, 2023, 50(3): 544 |
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| 作者姓名： | 裴浩 李万通 周逍灵 余敏 陶芳 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学生命科学学院，合肥 230036 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金（2108085MC72）资助。 |
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| 摘 要： | 转录因子的转录激活验证是分析其转录活性的有效手段之一。黄曲霉菌bZIP5基因广泛参与该菌的生长发育，因此拟进行该转录因子的体外活性检测，以pGBKT7为骨架载体，采用酵母同源重组法构建载体，与体外重组酶法进行比较，并考察不同长度同源序列对酵母同源重组法构建载体的影响。结果表明：采用外源重组酶法构建载体pGBKT7-bZIP5，需要经过片段的体外重组连接、转化大肠杆菌，再提取质粒转化酵母AH109进行激活验证；而酵母同源重组法只需将线性化载体和片段一起转化酵母AH109，载体构建与激活验证同步完成，且21 ~ 30 bp不同长度的同源序列对酵母同源重组法构建载体没有影响，目的基因bZIP5均显示有自激活能力，故基于酵母同源重组的载体构建方法可行。该方法无需提供外源重组酶，为基于酵母的载体构建提供了便捷的途径。
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| 关 键 词： | 载体构建；同源重组；酵母；bZIP5转录因子 |
| 收稿时间： | 2022-06-09 |
Transcription factor activation analysis based on yeast homologous recombination |
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| PEI Hao,LI Wantong,ZHOU Xiaolin,YU Min,TAO Fang. Transcription factor activation analysis based on yeast homologous recombination[J]. Journal of Anhui Agricultural University, 2023, 50(3): 544 |
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| Authors: | PEI Hao LI Wantong ZHOU Xiaolin YU Min TAO Fang |
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| Affiliation: | School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036 |
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| Abstract: | |
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