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鲤疱疹病毒2型 ORF144原核表达和多克隆抗体制备
引用本文:吴红军,潘李佳,李节,何艳格,杜宏瑶,龚保荣,吴宜靖,鲍传和,朱若林.鲤疱疹病毒2型 ORF144原核表达和多克隆抗体制备[J].安徽农业大学学报,2023,50(3):457.
作者姓名:吴红军  潘李佳  李节  何艳格  杜宏瑶  龚保荣  吴宜靖  鲍传和  朱若林
作者单位:安徽农业大学动物科技学院,合肥 230036
基金项目:安徽省高校自然科学基金(KJ2019A0164)资助。
摘    要:鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)引起的鲫造血器官坏死病是近年来对鲫(Carassius carassius)养殖业危害最大的疾病之一。通过PCR扩增得到ORF144基因全长,将其与pET-32a原核表达载体连接构建重组载体pET-ORF144,转化到大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到大小约 46 kDa的重组蛋白,该蛋白主要以不可溶的包涵体形式存在。将重组融合蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,间接ELISA检测显示抗体效价大于1∶51 200。经Western Blot验证该抗体可特异性识别感染CyHV-2的细胞中的蛋白质和纯化的融合蛋白。间接免疫荧光结果显示该蛋白定位于细胞质,呈点状分布。结果表明构建的ORF144多克隆抗体可为病毒的基因功能和致病机制研究提供基础。

关 键 词:鲤疱疹病毒2型  ORF144  原核表达  多克隆抗体
收稿时间:2022/5/24 0:00:00

The prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of Cyprinid herpesvirus 2 ORF144
WU Hongjun,PAN Liji,LI Jie,HE Yange,DU Hongyao,GONG Baorong,WU Yijing,BAO Chuanhe,ZHU Ruolin.The prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of Cyprinid herpesvirus 2 ORF144[J].Journal of Anhui Agricultural University,2023,50(3):457.
Authors:WU Hongjun  PAN Liji  LI Jie  HE Yange  DU Hongyao  GONG Baorong  WU Yijing  BAO Chuanhe  ZHU Ruolin
Institution:School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036
Abstract:
Keywords:Cyprinid herpesvirus 2  ORF144  prokaryotic expression  polyclonal antibodies
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