中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆 |
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引用本文: | 胡建和,刘湘涛,张彦明,韩雪清,刘在新,张永国,谢庆阁.中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆[J].畜牧兽医学报,2003,34(5):490-493. |
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作者姓名: | 胡建和 刘湘涛 张彦明 韩雪清 刘在新 张永国 谢庆阁 |
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作者单位: | 1. 中国农科院兰州兽医研究所,兰州,730046;西北农林科技大学;河南职业技术师范学院 2. 中国农科院兰州兽医研究所,兰州,730046 3. 西北农林科技大学 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划(G19990119) |
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摘 要: | 应用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C-株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18—T或pGEM-T Easy载体后进行测序。运用T-A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM-5Zf( )载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM-5Zf( )/F1-4和pGEM-5Zf( )/F5-7。再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM-5Zf( )载体,构建出了CSFVC-株全长cDNA重组质粒pGEM-5Zf( )/F1-7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。
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关 键 词: | 中国 猪瘟 C-株 脾淋毒 cDNA 分子克隆 兔脾组织 RNA 克隆 多片段一步连接法 |
文章编号: | 0366-6964(2003)05-0490-04 |
Molecular Cloning of Full-length cDNA of Chinese CSFV C-strain (Derived from Spleen) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Classical Swine Fever Virus C-strain Full-length cDNA Molecular cloning and construction |
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