| 绿色木霉的原生质体制备与转化条件 |
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| 引用本文： | 刘士旺,王政逸,郭泽建.绿色木霉的原生质体制备与转化条件[J].农业生物技术学报,2004,12(1):96-101. |
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| 作者姓名： | 刘士旺 王政逸 郭泽建 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,生物技术研究所,杭州,310029
2. 浙江大学,生物技术研究所,杭州,310029;中国农业大学,农学与生物技术学院,北京,100094 |
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| 基金项目： | 国家自然基金资助项目(30070493). |
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| 摘 要： | 对绿色木霉(Trichoderma viride)原生质体制备和再生的条件进行了较详细的分析,并在此基础上进行了木霉的转化.结果表明,木霉原生质体形成的合适条件为培养24 h的菌丝用4 mg/mL的Glucanex在磷酸盐缓冲液中(pH 6.98)、30℃、振荡(40 r/min)酶解4 h,原生质体产量达到4.7×107个/mg.原生质体在0.3 mol/L肌醇和0.3 mol/L KCl的CM培养基上再生率为14.5%.对绿色木霉原生质体的激发子基因转化,其转化率为每微克DNA得到1～2个转化子.转化子的PCR鉴定以及激发子抗体的特异酶联免疫测定(ELISA)结果,表明外源基因已转入绿色木霉并有稳定产物表达.
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| 关 键 词： | 绿色木霉 原生质体 转化 转化条件 生防因子 |
Isolation and Transformation of Trichoderma viride Protoplasts |
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